Survey of euthanasia methods used in neotropical chiropterans in São Paulo State, Brazil: critical analyses and proposal for standardization of bat euthanasia methods / evantamento dos métodos de eutanásia utilizados em quirópteros neotropicais no estado de São Paulo, Brasil: análise crítica e proposta de padronização de métodos de eutanásia em morcegos

Zoonotic Surveillance Divisions (ZSDs) rescue and euthanize bats in contact with humans. The euthanasia procedure should be conducted safely for the animal and caretaker and minimal stress for the animal is important. The objectives of this study were: i. evaluate the methods of euthanasia used by ZSDs in the State of São Paulo; ii. compare the methods with national and international guidelines for animal euthanasia practices; iii. assess the methodologies considering taxonomy and eating habits of the main bat species, and iv. propose standardization of euthanasia procedures. Sixty-five ZSDs locations received an online questionnaire or were contacted by telephone and 33 ZSDs (50.8%) responded and are distributed in 11 mesoregions in the state to remain anonymous. The euthanasia methods were divided into chemical (injectable or inhalation), physical, or mixed methods. Bat specimens (n = 550) were identified and classified to evaluate the main genera found in the state. The location of the ZSD, species, eating habits, and the method of euthanasia used were analyzed. The specimens by bat families were Molossidae (n = 340), Phyllostomidae (n = 171), and Vespertilionidae (n = 39). Chemical methods were used in 25 ZSDs (75.75%), physical in 5 (15.15%), and mixed in 3 (9.09%). There is no uniformity or standardization in bat euthanasia methods used by ZSDs, although most are based on acceptable chemical methods. It was proposed an algorithm to assist the veterinarian in choosing the method of euthanasia for bats that will allow standardizing euthanasia procedures for this species, considering physiological differences, and respecting technical, bioethical, and animal welfare guidelines.(AU)

As Divisões de Vigilância de Zoonoses (DVZs) coletam e eutanasiam morcegos que tiveram contato com humanos. O procedimento de eutanásia precisa ocorrer de modo seguro para o animal e para o manipulador, sendo importante garantir o mínimo de estresse ao animal. Os objetivos deste estudo foram: i. avaliar os métodos de eutanásia praticados nas DVZ do estado de São Paulo; ii. comparar esses métodos com os guias nacionais e internacionais de práticas de eutanásia animal; iii. avaliar as metodologias aplicadas considerando a taxonomia e os hábitos alimentares das principais espécies de ocorrência de morcegos; e iv. propor a padronização dos procedimentos de eutanásia. Sessenta e cinco DVZs receberam o questionário online ou foram contatadas por telefone, dessas, trinta e três DVZs (50,8%) que responderam ao questionário foram incluídas no estudo e distribuídas em 11 mesorregiões para garantir anonimato. Os métodos de eutanásia reportados foram divididos em métodos químicos (injetáveis; inalatórios), físicos ou mistos. Os espécimes de morcegos (n = 550) foram identificados e classificados para avaliar os principais gêneros encontrados no estado. A localização da DVZ, as espécies, os hábitos alimentares e o método de eutanásia utilizado foram analisados. Os espécimes por família de espécies de morcegos foram Molossidae (n = 340), Phyllostomidae (n = 171) e Vespertilionidae (n = 39). Métodos químicos foram utilizados em 25 DVZs (75,75%), físicos em 5 (15,15%) e mistos em 3 (9,09%). Não há uniformidade ou padronização nos métodos de eutanásia de morcegos, embora a maioria seja baseada em métodos químicos aceitáveis. É proposto um algoritmo para auxiliar o veterinário na escolha do método de eutanásia, que permite a padronização desses procedimentos para os morcegos, considerando as diferenças fisiológicas e respeitando as diretrizes técnicas, bioéticas e de bem-estar animal.(AU)

Progressão da lesão periapical em animais sob condições de estresse e modulação inflamatória através de bloqueador adrenérgico e inibidor seletivo da recaptação da serotonina / Progression of periapical lesion in animals under stress conditions and inflammatory modulation through adrenergic blocker and selective serotonin reuptake inhibitor

O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos do estresse crônico sobre a periodontite apical (PA) induzida em ratos, e avaliar os efeitos do uso da Fluoxetina (antidepressivo da classe dos inibidores da recaptação de serotonina) e do Propranolol (bloqueador beta-adrenérgico), associados ou não, na modulação inflamatória e na reabsorção óssea periapical de ratos estressados. Foram utilizados 40 ratos divididos em cinco grupos: Grupo controle não-estressado (NS); Grupo controle estressado com administração de solução fisiológica (SS); Grupo estressado com administração de Fluoxetina (SF); Grupo estressado com administração de Propranolol (SP); Grupo estressado com administração de Fluoxetina e Propranolol (SFP). Os animais dos grupos estressados foram submetidos ao protocolo de estresse crônico imprevisível durante 6 semanas e as respectivas medicações foram administradas diariamente, via gavagem, ao longo de todo o período experimental. A PA foi induzida em todos os grupos após 21 dias do início do protocolo de estresse e ao final da 6ª semana, os animais foram eutanasiados e as hemimandíbulas e hemimaxilas removidas. Posteriormente foram realizadas as seguintes análises: a) da massa corporal; b) dos níveis séricos de corticosterona por radioimunoensaio; c) dos níveis séricos hormonais e inflamatórios por ensaio Multiplex; e) histomorfométrica por coloração com hematoxilina e eosina; f) da estrutura óssea periapical através de microtomografia computadorizada (micro-CT); g) da expressão gênica de biomarcadores relacionados à atividade osteoclástica, citocinas inflamatórias e metaloproteinases na região periapical por RT-PCR. Ao final do experimento os animais estressados apresentaram menor ganho de massa corporal, níveis séricos de ACTH significativamente mais altos, atividade inflamatória mais intensa e maiores volumes de lesão periapical quando comparados aos animais do grupo controle NS. Os grupos tratados SF, SP e SFP apresentaram menores volumes de lesão periapical quando comparados ao grupo controle SS, e o grupo SP apresentou menor intensidade do infiltrado inflamatório. O teste de RT-PCR mostrou maior expressão de RANKL e TRAP no grupo controle SS, bem como maior expressão de IL-6, IL-10 e IL-17 e MMP-8 quando comparado ao grupo controle NS. Na comparação em relação ao grupo controle SS, o grupo SF apresentou maior expressão de OPG, e menor expressão de IL-6 e IL-17; o grupo SP apresentou maior expressão de OPG e menor expressão de IL-6, IL-10, IL-17, MMP-8 e MMP-13, e o grupo SFP apresentou menor expressão de RANKL, TRAP, IL-6, IL-10, IL-17, MMP-8 e MMP-13. Foi concluído que o estresse crônico influenciou negativamente a patogênese da PA e ambos os medicamentos avaliados, bem como sua associação, tiveram efeitos positivos na prevenção da perda óssea e modulação inflamatória.

The aim of this study was to analyze the effects of chronic stress on induced apical periodontitis (AP) in rats, and to evaluate the effects of the use of fluoxetine (antidepressant known as selective serotonin reuptake inhibitor), and of Propranolol (beta-adrenergic blocker), associated or not, in inflammatory modulation and periapical bone resorption in stressed rats. Forty rats were divided into five groups: Unstressed control group (NS); Stressed control group with saline solution administration (SS); Stressed group with administration of Fluoxetine (SF); Stressed group with administration of Propranolol (SP); Stressed group with administration of Fluoxetine and Propranolol (SFP). The animals in the stressed groups were submitted to the unpredictable chronic stress paradigm for 6 weeks and the respective medications were administered daily, via gavage, throughout the entire experimental period. AP was induced in all groups, 21 days after the beginning of the stress paradigm, and at the end of the 6th week, the animals were euthanized and the hemi-mandibles removed for the following analyses: a) body weight b) serum corticosterone levels by radioimmunoassay; c) hormone and inflammatory serum levels by Multiplex assay; e) histomorphometric staining with hematoxylin and eosin; f) the periapical bone structure through computerized microtomography; g) gene expression related to osteoclastic activity, inflammatory cytokines and metalloproteinases in the periapical region by RT-PCR. At the end of the experiment, the stressed animals showed lower body weight gain, significantly higher levels of ACTH, more intense inflammatory infiltrate and higher volumes of periapical lesion when compared to animals in the NS control group. The treated groups SF, SP and SFP had smaller volumes of periapical lesion when compared to the SS control group and the SP group had lower intensity of inflammatory infiltrate. The RT-PCR test showed higher expression of RANKL and TRAP in the stressed control group, as well as higher expression of IL-6, IL-10, IL-17 and MMP-8 when compared to the NS control group. In comparison with the SS control group, the SF group showed higher expression of OPG, and lower expression of IL-6 and IL-17; the SP group showed higher expression of OPG and lower expression of IL-6, IL-10, IL-17, MMP-8 and MMP-13 and the SFP group showed lower expression of RANKL, TRAP, IL-6, IL-10, IL-17, MMP-8 and MMP-13. It was concluded that chronic stress negatively influenced the pathogenesis of apical periodontitis and both medications evaluated, as well as its association, had positive effects in preventing bone loss and inflammatory modulation.

Evaluation of the euthanasia of seropositive dogs for canine visceral leishmaniasis as the only method of controling the disease in the enzootic area in the Midwestern Minas Gerais / Avaliação da eutanásia de cães soro reagentes para leishmaniose visceral canina como único método de controle da doença em área enzoótica no Centro Oeste de Minas Gerais

Human Visceral Leishmaniasis (VL) is expanding, and it is distributed in the five geographic regions of Brazil, with the Northeast being the region that presents the most significant number of registered cases. The main urban reservoir of the etiological agent of VL is the domestic dog, and it is known that canine cases precede human cases. One of the control actions of VL, recommended by the Ministry of Health, is performing the euthanasia of seropositive dogs. In 2013, in the municipality of Iguatama/MG, the first canine serological survey was carried out in the city, with a prevalence of 8.3% of seropositive dogs for Leishmania infantum. Of the seropositive animals for Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) in this survey, 84% were euthanized, and 16% died within two years after diagnosis. No other control measures for CVL were taken in the municipality. The objectives of the present study were to determine the current prevalence of seropositive dogs for CVL in the municipality of Iguatama and to observe the impact of euthanasia of seropositive dogs to VL as the only control measure performed in this municipality, which is considered an enzootic area of the disease. For this, a new canine epidemiological survey was carried out in the municipality of Iguatama, following the guidelines of the Manual of Surveillance and Control of Visceral Leishmaniasis. Blood samples were collected from 270 dogs and tested by DPP® immunochromatographic test and by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). The animals that presented inconclusive results had new blood samples collected and analyzed. The only animal that showed a positive result in DPP® and undetermined in the ELISA, in the first evaluation, became seropositive four months later, so this study reinforces the recommendation of the Ministry of Health to reassess dogs that present inconclusive results for CVL. From a total of 270 samples, 21 (7.8%) were reagents in both tests. Thus, the prevalence of seropositive dogs for CVL, in 2017, in the urban area of the municipality of Iguatama was 7.8%. The Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) molecular technique confirmed infection by L. infantum in the ten dogs sampled with CVL-positive serology. The comparison between the current prevalence (after euthanasia) with that found in 2013 (8.3%), there was no significant difference (p=0.764). The prevalence of CVL in the urban area of the municipality of Iguatama is still high, making it possible to presume that the euthanasia of seropositive dogs for CVL, and the absence of monitoring or other interventions measures, did not contribute to decrease the transmission of the parasite and was not sufficient for the control of CVL in the municipality of Iguatama, an area considered as non-endemic to CVL until 2013.(AU)

A Leishmaniose visceral humana (LV) está em franca expansão e distribuída nas cinco regiões geográficas do Brasil, o Nordeste sendo a região em que há o maior número de casos registrados. O principal reservatório urbano do agente etiológico da LV é o cão doméstico e sabe-se que casos caninos antecedem o aparecimento de casos humanos. Uma das ações de controle da LV, preconizada pelo Ministério da Saúde, é a eutanásia dos cães soro reagentes. Em 2013, no município de Iguatama/MG, foi realizado o primeiro inquérito sorológico canino na cidade, sendo constatada uma prevalência de 8,3% de cães soro reagentes para Leishmania infantum. Dos animais com sorologia positiva para Leishmaniose visceral canina (LVC), neste inquérito, 84% foram eutanasiados e 16% foram a óbito em, no máximo, dois anos após o diagnóstico. Nenhuma outra medida de controle para LVC foi realizada no município. Os objetivos deste estudo foram determinar a prevalência atual de cães soro reagentes para LVC no município de Iguatama e observar o impacto das eutanásias de cães soro reagentes para LV como única medida de controle realizada neste município, considerado área enzoótica para a doença. Para isso, foi realizado um novo inquérito epidemiológico canino no município de Iguatama, seguindo as normas do Manual de Vigilância e Controle da Leishmaniose Visceral. Foram colhidas amostras sanguíneas de 270 cães que foram examinadas pelo teste imunocromatográfico DPP® e pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). Os animais que apresentaram resultados inconclusivos tiveram novas amostras de sangue coletadas e analisadas. O único animal que apresentou resultado positivo no DPP® e indeterminado no ELISA, na primeira avaliação, soro converteu quatro meses depois, o que reforça a recomendação do Ministério da Saúde de reavaliar os cães que apresentam resultado inconclusivo para LVC. Do total das 270 amostras, 21 foram reagentes nos dois testes. Portanto, a prevalência de cães soro reagentes para LVC, em 2017, na área urbana do município de Iguatama foi igual a 7,8%. A infecção pela espécie Leishmania infantum foi confirmada através da técnica molecular de PCR-RFLP em 10 cães amostrados com sorologia positiva para LVC. A comparação entre a prevalência atual (depois das eutanásias) com a encontrada em 2013 (8,3%), não mostrou diferença significativa (p=0,764). Uma vez que a soro prevalência de LVC na área urbana do município de Iguatama ainda é alta, pode-se supor que a eutanásia dos cães soro reagentes para LVC, somada à ausência de monitoramento e de outras medidas de intervenção, não contribuiu para a diminuição da transmissão do parasito, e não foi suficiente para o controle de LVC no município de Iguatama, uma área considerada, até 2013, indene para LVC.(AU)

Natural Infection by Leishmania infantum in domestic cats (Felis catus) in a municipality of moderate transmission in the Brazilian semi-arid region / Infecção natural por Leishmania infantum em gatos domésticos (Felis catus) em município de transmissão moderada no semiárido brasileiro

Abstract The main clinical, anatomopathological, and molecular aspects of the infection by Leishmania infantum are described in two cats with multicentric cutaneous, nodular, and ulcerated lesions. The animals were submitted to a clinical examination, followed by serological, molecular and parasitological exams, with culture and isolation of the parasite, and subsequent isoenzymatic characterization. The animals were euthanized and necropsied. Case 1 was an adult, female, mixed-bred stray cat. Case 2 was an adult, male, mixed-bred and domiciled cat. Both were positive for the presence of anti-L. infantum antibodies. In the cytology of the cutaneous nodules and lymph nodes, amastigote forms of Leishmania spp. could be visualized, free and in the interior of the macrophages. In the histopathology, the lesions were characterized by nodular granulomatous and/or ulcerative dermatitis, associated to amastigote forms of Leishmania spp. By means of the polymerase chain reaction, the sequence of the L. infantum kDNA minicircle was amplified. It is concluded that the infection by L. infantum occurs in cats in the State of Paraíba, Northeast region of Brazil and the need to understand the immunological profile of the visceral leishmaniasis in the feline population is highlighted with aimed at the control measures in public health.

Resumo Descrevem-se os principais aspectos clínicos, anatomopatológicos e moleculares da infecção por Leishmania infantum em dois gatos, cuja queixa era de lesões cutâneas multicêntricas, nodulares e ulceradas. Os animais foram submetidos à avaliação clínica, seguida de exames sorológicos, molecular e parasitológico, com cultura e isolamento do parasita e posterior caracterização isoenzimática. Os animais foram eutanasiados e encaminhados para a necropsia. O caso 1 era uma gata adulta, sem raça definida e errante. O caso 2 era um gato adulto, sem raça definida e domiciliado. Ambos foram positivos para a presença de anticorpos anti-L. infantum. Na citologia dos nódulos cutâneos e linfonodos, puderam ser visualizadas formas amastigotas de Leishmania spp. livres e no interior de macrófagos. Na histopatologia, as lesões se caracterizavam por dermatite granulomatosa nodular e/ou ulcerativa, associadas a formas amastigotas de Leishmania spp. Por meio da reação em cadeia da polimerase, amplificou-se a sequência do minicírculo do kDNA de L. infantum. Conclui-se que a infecção por L. infantum ocorre em gatos no estado da Paraíba, região Nordeste do Brasil. Deve-se ressaltar a necessidade de compreender o perfil imunológico e epidemiológico da leishmaniose visceral na população felina, com vistas às medidas de controle em saúde pública.

Causes of death and euthanasia in domestic cats in the Santa Catarina plateau (1995-2015) / Causas de morte e eutanásia em felinos domésticos no Planalto de Santa Catarina (1995-2015)

Knowledge about the causes of death in felines constitutes important information to owners, veterinarians, and researchers, aiming at reducing the number of deaths in this species. In order to determine the main causes of death or euthanasia in cats in the Santa Catarina plateau, data from 1995 to 2015 available in necropsy files of the Laboratory of Animal Pathology (LAPA) of the State University of Santa Catarina (UDESC) were collected and evaluated. In that period, 1,728 cats were necropsied, mainly males (46.12%) and adults (50.11%). The mean ages at death for kittens, adults, and elderly were 5.07 months, 3.9 years, and 13.9 years, respectively. Of the 1,728 necropsy reports assessed, the cause of death was identified in 1,184 (68.52%) cases. The main cause of death was associated with infectious diseases (15.8%), with prevalence of feline infectious peritonitis (29.76%), followed by neoplasms (11.98%) with lymphoma (44.93%) and leukemia (16.91%) as the most common, and traumas (11.81%) mainly caused by motor vehicle accidents. These results show the need for owner awareness, as well as establishment of prophylaxis and vaccination programs, aimed at reducing the number of deaths and thus increasing life expectancy in the feline population.(AU)

O conhecimento a respeito da causa mortis em felinos é importante para que se construa um informativo para proprietários, médicos veterinários e pesquisadores, objetivando a redução no número de mortes na espécie. Com o intuito de determinar as principais causas de morte ou eutanásia em felinos domésticos no planalto catarinense foram avaliados os arquivos de registro das necropsias do período de 1995 a 2015 do Laboratório de Patologia Animal da Universidade do Estado de Santa Catarina. No período, foram necropsiados 1.728 felinos, principalmente machos (46,12%), adultos (50,11%). A idade média para filhotes foi de 5,07 meses, enquanto para adultos foi 3,9 anos e para idosos 13,9 anos. Das 1.728 necropsias de felinos, a enfermidade que levou o animal a morte foi determinada em 1.184 (68,52%). As doenças infecciosas foram a principal causa de morte (15,8%), dentre as quais a peritonite infecciosa felina (29,76%) foi a mais frequente; seguida das neoplasias (11,98%), sendo o linfoma (44,93%) e a leucemia (16,91%), as mais comuns; e dos traumatismos (11,81%), principalmente atropelamentos por veículos automotivos. Estes resultados refletem a necessidade da conscientização dos proprietários, bem como da instituição de programas de profilaxia e vacinação, visando a redução de mortes e o aumento na expectativa de vida para a população felina.(AU)

Leishmaniose visceral canina nos municípios de Araçatuba e Birigui, estado de São Paulo, Brasil / Visceral leishmaniasis in the municipalities of Araçatuba and Birigui, state of São Paulo, Brazil

Introdução: A premissa do programa nacional de controle da leishmaniose visceral (LV) é que a doença humana esteja relacionada com a canina, sendo o controle do reservatório canino um dos focos do programa. Objetivos: Mensurar a taxa de incidência da LV em humanos, relacionando-a com as coberturas do controle químico e do reservatório canino. Relacionar a soroprevalência canina com características dos cães e de seus tutores. E avaliar a eficácia da eutanásia de cães soropositivos no controle da infecção canina. Métodos: Os casos humanos e os domicílios com cães soropositivos registrados no período de 2007 a 2015 no município de Araçatuba, estado de São Paulo, foram geocodificados e calculadas a soroprevalência canina, a taxa de incidência humana e as coberturas das atividades de inquérito sorológico, eutanásia e controle químico. A associação entre as variáveis foi avaliada por comparação de mapas, por regressão linear e pela função K de Ripley. Um estudo transversal foi conduzido entre 2015 e 2016, nos municípios de Araçatuba e Birigui, tendo como base uma amostra da população canina. A soroprevalência foi modelada por regressão logística em uma abordagem geoestatística usando a aproximação de Laplace integrada aninhada para inferência bayesiana. Dados secundários e dos inquéritos realizados foram utilizados para elaborar e calibrar modelos dinâmicos. Resultados: Observou-se no município de Araçatuba a diminuição da taxa de incidência LV e da soroprevalência canina, apesar das coberturas de controle terem sido baixas no mesmo período estudado. O inquérito sorológico revelou uma soroprevalência canina de 8% em Araçatuba e 4% em Birigui. Em Araçatuba a ocorrência de cães soropositivos foi associada à domicílios que tiveram mais de 10 cães ao longo do tempo, domicílios com histórico de cães com a infecção ou que morreram por outras causas não naturais, e à permanência dos cães no peridomicílio ao longo do dia. Foi observada dependência espacial (46 m) entre as observações. Considerando controle contínuo e um esforço das atividades de inquérito sorológico três vezes maior que a média do observado em Araçatuba e duas vezes maior em Birigui, as atividades relacionadas à eutanásia de cães com diagnóstico positivos possibilitariam, em teoria, o controle da infecção canina. Conclusões: A diminuição da LV ao longo do tempo está relacionada com as ações de controle, uma vez que pequenas alterações na dinâmica da infecção canina têm importância epidemiológica. O encontro de dependência espacial entre os domicílios com casos caninos em pequenas distâncias reforça a existência de um padrão local da transmissão da infecção entorno dos domicílios, relacionado com as características do vetor. A eutanásia de cães soropositivos, em teoria, é capaz de controlar a infecção canina, porém, este resultado desse ser entendido com cautela, dada a complexidade operacional desta medida e as questões éticas relacionadas. Novos estudos precisam ser desenvolvidos para uma melhor compreensão se fatores além das atividades de controle estariam envolvidos na diminuição da incidência da LV. Faz-se necessário planejamento a longo prazo das ações de controle e investimento em pesquisas sobre o custo-efetividade de outras medidas que auxiliem no controle da LV

Background: The assumption of visceral leishmaniasis (VL) control program is that human disease (HVL) is related to canine infection (CanL), and that supports the culling of infected dogs. Objectives: Estimate the coverage of visceral leishmaniasis (VL) control measures and to relate them to the occurrence of HVL in an endemic urban area (Araçatuba, SP). Determine the CanL seroprevalence and to evaluate its relationship with the characteristics of dogs and their owners. Evaluated the culling dogs efficacy in controlling the canine infection. in the municipalities of Araçatuba and Birigui, state of São Paulo, Brazil. Methods: The cases of HVL and households with seropositive dogs registered in the period from 2007 to 2015 were geocoded the coverage of the serological inquiry, culling dogs and chemical spaying, canine seroprevalence and HVL incidence rates were calculated. The relationship between CanL, HVL and control measures was evaluated by map comparison, by linear regression and was also assessed using the Ripley K function. A cross-sectional study was conducted between 2015 and 2016, based on a sample of the canine population. Seroprevalence was modelled by logistic regression in a geostatistical approach using the integrated nested Laplace approximation for Bayesian inference. The spatial component was modelled by a Gaussian field, using a stochastic partial differential equation approach. Secondary data and the surveys were used to elaborate and calibrate dynamic models of canine disease transmission. Results: Verified the decrease of HVL and the CanL in Araçatuba over time, even in low coverage of control measures. The CanL seroprevalence was 8% in Araçatuba and 4% in Birigui. The occurrence of a seropositive dog in Araçatuba was associated with the presence of more than 10 dogs living in the same house, house with dogs that previously died of VL or died of other unnatural causes, and the place of dogs stayed during the day. Spatial dependence among observations occurred within about 46 m. Considering a continuous control and a serological survey effort three times higher than the average of the observed in Araçatuba and twice as high in Birigui, the activities related to culling dogs is effective in controlling canine infection. Conclusions: The observation of VL decrease over time may be related to control measures. The short-distance spatial dependence could be related to the vector characteristics, producing a local neighbourhood VL transmission pattern. The culling dogs were effective in controlling the disease in the dogs\' population. However, this result should be understood with caution given the operational complexity of this measure and related ethical issues. New studies need to be developed for a better understanding if factors other than control activities would be involved in reducing the incidence of VL. It is necessary in addition to long-term planning of the control actions carried out by the program, investment in researches that evaluate the cost-effectiveness of other measures that may help in the control of VL

Influência de uma comissão de ética na proteção de animais / The impact of an ethics committee on animal protection / Influencia de una comisión de ética en la protección de animales

Resumo O estabelecimento de comissões de ética no uso de animais em ensino e pesquisa concretiza nova ética nas relações com animais não humanos. Realizou-se estudo estatístico sobre dados de 390 protocolos de pesquisa avaliados durante oito anos por uma comissão em uma universidade brasileira, buscando determinar se essa atuação foi capaz de reduzir o sofrimento e diminuiu proporcionalmente a prática de eutanásia. Empregou-se extensão do teste de Wilcoxon para verificar a tendência de procedimentos de proteção como melhor previsão de estresse e dor nos protocolos, uso mais frequente de anestesia e sedativos e redução de eutanásias executadas. Os resultados mostraram significância estatística em todos os três itens, sugerindo efeito concreto na proteção animal. O método utilizado é proposto ainda como forma de avaliar o uso desses procedimentos pelas comissões.

Abstract The creation of animal ethics committees in teaching and research establishes a new ethics in relations with non-human animals. The present article carried out a statistical study of data from 390 research protocols evaluated over eight years by a commission at one Brazilian university, to determine if its actions brought about a reduction in suffering and a proportional decrease in the practice of euthanasia. A statistical significance study was carried out using an extension of the Wilcoxon test, seeking to verify a long-term trend of protection procedures, such as lower predicted levels of stress and pain in protocols, more frequent use of anesthesia and sedatives and a reduction in euthanasia. The results were statistically significant for all three of these items, suggesting a concrete effect of animal protection. The method used is proposed as a form of evaluating the use of these procedures by commissions.

Resumen El establecimiento de comisiones de ética en el uso de animales en enseñanza e investigación concreta una nueva ética en las relaciones con los animales no humanos. Se realizó un estudio estadístico a partir de los datos de 390 protocolos de investigación evaluados durante ocho años por una comisión en una universidad brasileña, buscando determinar si esa actuación fue capaz de reducir el sufrimiento y de disminuir proporcionalmente la práctica de la eutanasia. Se empleó una extensión del test de Wilcoxon para verificar la tendencia de procedimientos de protección, como una mejor previsión de estrés y dolor en los protocolos, el uso más frecuente de anestesia y sedantes, y la reducción en la realización de eutanasia. Los resultados mostraron una significancia estadística en estos tres ítems, sugiriendo un efecto concreto en la protección animal. El método utilizado se propone, también, como una forma de evaluar el uso de estos procedimientos por parte de las comisiones.

Aspectos clínicos, cirúrgicos, histológicos e pós-operatórios de oito cadelas com leiomioma vaginal / Clinical, surgical, histological and postoperative aspects in the case of eight bitches with vaginal leiomyoma

O presente trabalho reporta as características clínicas e cirúrgicas de oito casos de cadelas portadoras de leiomioma vaginal, com histórico de aumento de volume na região perineal, aparecimento de massa pela vulva, disquezia, tenesmo e disúria. As pacientes foram submetidas à cirurgia de episiotomia para ressecção da massa neoplásica, e em quatro casos foi necessária a ovariossalpingo-histerectomia. Porém, uma delas apresentou recidiva, e, no segundo procedimento cirúrgico de exérese de neoformação, o histopatológico diagnosticou leiomiossarcoma. A paciente ainda apresentou mais duas recidivas, até o proprietário optar pela eutanásia. Decorridos quatro meses, as sete cadelas diagnosticadas com leiomioma não apresentaram recidiva, e os proprietários relataram ausência de sinais relacionados com a doença descrita. Conclui-se que a episiotomia para ressecção da massa vaginal e a ovariossalpingo-histerectomia nas cadelas inteiras nos casos de tumores vaginais benignos são tratamentos satisfatórios, com bom prognóstico, ao contrário do leiomiossarcoma.

This study reports the clinical and surgical procedures of eight cases of bitches with vaginal leiomyoma. All animals presented increased volume in the perineal region, and exteriorization of the vulva, dyschezia, tenesmus and dysuria. The patients underwent episiotomy surgery for resection of the neoplastic mass, and ovariosalpingohisterectomy in four cases. However, one had recurrence on the second surgical procedure for removal of neoformation, histopathological diagnosed leiomyosarcoma, the patient also had two more relapses, until the owner chose euthanasia. After four months, the seven dogs diagnosed with leiomyoma showed no recurrence and the owners reported no signs of the disease described. We concluded that episiotomy for vaginal mass resection combined with ovariohysterectomy in cases of benign vaginal tumors have shown satisfactory treatment with good prognostic.

O uso de um instrumento de política de saúde pública controverso: a eutanásia de cães contaminados por leishmaniose no Brasil / Use of an instrument of controversial public health policy: euthanasia of dogs contaminated by leishmaniasis in Brazil

A leishmaniose visceral é uma zoonose transmitida por vetor, de importância mundial, que envolve os cães como reservatórios. A "eliminação dos reservatórios" está prevista expressamente como medida de controle no Manual de Vigilância e Controle da Leishmaniose Visceral elaborado pela Secretaria de Vigilância em Saúde, órgão do Ministério da Saúde. Contudo, a eliminação de cães soropositivos no Brasil, usada para controlar a leishmaniose visceral, tem sido pouco efetiva. Este trabalho levanta questionamentos sobre esse instrumento de política nacional de saúde pública com base em evidências científicas atuais e análises do ordenamento jurídico brasileiro, realizadas a partir do princípio da precaução e do reconhecimento dos animais como seres sencientes. Conclui-se pela imediata suspensão e revisão da prática de extermínio animal em um Estado Constitucional de Direito, e a adoção de métodos preventivos e mais eficazes que garantam a saúde pública sem proporcionar elevados custos emocionais aos proprietários de cães e financeiros aos cofres públicos.

Visceral leishmaniasis is a zoonotic disease trans mitted by a vector of global importance, which involves dogs as reservoirs. The "elimination of reservoirs" is specifically determined as a control measure in the Manual de Vigilância e Controle de Leishmaniose Visceral [Manual of Surveillance and Control of Visceral Leishmaniasis] published by the Department of Health Surveillance of the Brazilian Ministry of Health. However, the elimination of seropositive dogs in Brazil, used to control visceral leishmaniasis, has been ineffective. This paper rais es questions about this national public health policy instrument based on current scientific evidence and analysis of the Brazilian law, held from the precau tionary principle and the recognition of animals as sentient beings. It concludes that an immediate suspension and a review of animal extermination practice in the Brazilian Constitutional Rule of Law is needed and the adoption of preventive and more effective methods to ensure public health without providing either emotional costs to dog owners nor burdening the public budget.

Toxicological evaluation of the flavonoid rutin on the reproductive system of wistar rats / Avaliação toxicológica do flavanoide rutina no sistema reprodutor de ratos wistar

Introduction: Rutin, a flavonoid commonly found in nature, has anti-mitotic, vasoprotective, and antihyperlipidemic activity. When hydrolyzed as quercetin, it promotes inhibition of spermatozoa motility, alterations in the prostate, and in the levels of testosterone and dihydrotestosterone. Objective: This study aimed to evaluate the toxicity of rutin in Wistar rats. Methods: Animals were divided into Control (1 ml of distilled water), Treated I, II and III, respectively receiving 5, 10 and 20 mg/kg/day of rutin for seven consecutive days. When euthanasia was performed after 10, 42 and 60 days into the experiment, a laparotomy was performed and the testicles, prostate, seminal vesicles, epididymis, epididymal spermatozoa to be counted, as well as the liver, spleen and kidneys were removed. Hematological and biochemical tests were performed. Results: Hepatomegaly was observed and in the reproductive system, the weight of the epididymis was reduced, not affecting any other organ examined. Conclusion: Except by the reduction of the weight of the epididymis, which is reversible at 42 days of completion of treatment, no suggestive data of the toxicity of rutin on the reproductive system of adult rats were found.

Estudo do destino dos cães no canil municipal de Botucatu antes e após a Lei nº 12916 que dispõe sobre o controle da reprodução de cães / Study of the destination of dogs in the municipal kennel of Botucatu before and after the Law n° 12916 which establishes the control of dog reproduction / Estudio del destino de los perros en la perrera municipal de Botucatu antes y después de la Ley n° 12916 que establece el control de reproducción canina

Apesar do recolhimento de cães em via pública, domicílios ou do acolhimento pelos Centros de Controle de Zoonoses ser uma prática adotada que não controla a população canina, é uma atividade considerada medida primária e complementar de controle de zoonoses. O excedente populacional canino, além de sua importância na cadeia de transmissão de diversas doenças, representa também problemas em decorrência das agressões, acidentes de trânsito e impactos ambientais. Considerando a falta de informações sobre a dinâmica do destino de cães em canis após a Lei Estadual número 12.916/08 (dispõe sobre o controle da reprodução de cães e dá providências correlatas), o presente trabalho objetivou analisar o destino dos cães recolhidos pela Prefeitura Municipal de Botucatu e transportados ao Canil Municipal e também os doados pela população, comparativamente antes e depois da implementação da Lei. Foram analisadas 4038 fichas de entrada de cães do Canil, as quais foram armazenadas no banco de dados gerados pela planilha EXCEL e analisados por meio de Censo. Antes da Lei, eram eutanasiados 2193 (70%) cães e após, 639 (69%), percentualmente os valores são similares, entretanto, há uma diferença de 1557 cães eutanasiados. Esta diferença pode ser explicada pelos cuidados médicos veterinários oferecidos aos cães recolhidos, após a Lei, para posterior adoção, uma vez que antes a única medida adotada era a eutanásia. Os resultados permitiram concluir que a Lei impôs mudanças nos procedimentos no Canil, principalmente a diminuição do número de eutanásias realizadas, consequentemente aumentou a permanência desses animais. Também os motivos predominantes para o recolhimento dos cães.

Despite the gathering of dogs on public streets, homes and by the Centers for Zoonoses Control is a practice adopted that does not control the dog population, it is an activity considered as primary and supplementary of the zoonoses control. The canine surplus population, besides the important role in the chain of transmission of various diseases, is also due to problems of aggressions, traffic accidents and environmental impacts. Considering the lack of information on the dynamics destination of dogs in kennels after the State Law number 12.916/08 (provides for the control of dog reproduction and gives related provisions), the present study aimed to analyze the destination of dogs gathered by the Municipality Botucatu and transported to the Municipal Kennel and also donated by the population comparison before and after the implementation of the Law. Were analyzed 4038 input records of the dogs of the kennel, which were stored in the database generated by EXCEL spreadsheet and analyzed through Census. Before the Law, were euthanized 2193 (70%) and after 639 dogs (69%), percentage terms values are similar, however, there is a difference of 1557 dogs euthanized. This difference can be explained by the veterinary medical care offered to dogs gathered after the Law, for subsequent adoption. Since before the only measure taken was euthanasia. The results concluded that the law imposes considerable changes in behaviors and procedures performed in the kennel, especially the decrease in the number of euthanized dogs and the adoption of more selective criteria for the gathering of dogs on public roads.

A pesar de la recogida de perros en las calles, domicilios y la acogida por el Centro de Control de Zoonosis no ser una práctica adoptada para controlar la población de perros, es una actividad que se considera medida primaria y complementaria para controlar las zoonosis. El exceso de población canina, y su importancia en la cadena transmisión de diversas enfermedades también representa problemas como consecuencia de las agresiones, accidentes de tránsito e impactos ambientales. Teniendo en cuenta la falta de información sobre la dinámica del destino de los perros en las perreras después de la Ley del Estado número 12.916/08 (que dispone sobre control de reproducción canina y disposiciones conexas), el presente estudio tuvo como objetivo analizar el destino de los perros de la Intendencia Municipal de Botucatu y transportados a la perrera Municipal, y también los donados por la población en comparación anterior y posterior a la implementación de la ley. Fueron analizadas 4038 fichas de entrada de perros en la perrera, las cuales se almacenaron en la base de datos generada en EXCEL y analizadas mediante Censo. Antes de la ley, fueron sacrificados 2193 (70%) perros y después de la ley, 639 (69%); los valores porcentuales son similares, sin embargo, hay una diferencia de 1.557 perros eutanasiados. Esta diferencia se explica por la atención médica veterinaria que se ofrece a los perros recogidos después de la ley para su posterior adopción, una vez que antes la única medida tomada era la eutanasia. Los resultados concluyeron que la ley impuso cambios en los procedimientos en la perrera, principalmente para reducir el número de perros eutanasiados, como consecuencia, se incrementó la permanencia de estos animales. También las razones predominantes para la recogida de los perros de las calles son los que tenían algún tipo de riesgo para la población.

Microbiological profile of donor corneas stored for tectonic transplantation purposes in rabbits / Microbiologia de amostras de bancos de córneas destinadas a transplantes, em coelhos

This study aimed to evaluate the microbiota of donor rabbit corneas stored for tectonic transplantation purposes. Swabs from both corneas of 20 rabbits were carefully collected and submitted to microorganism isolation and identification. After this first swab collection, rabbits were euthanized for reasons other than this project and the eyes were enucleated. The corneas were collected and stored to compose the cornea tissue bank. Corneas were stored in a 0.3% tobramycin solution at -20ºC. After 30 days, the corneas were thawed at room temperature and removed from the antibiotic. New swabs were obtained from the corneas and submitted to microorganism isolation and identification. Gram positive organisms were predominant in the rabbit corneal flora before storage and the Staphylococcus sp. was the most common microorganism isolated from those samples. No growth was observed on the samples collected after storage. The methods used for collection and storage of the corneas were efficient to constitute a sterile donor corneal tissue bank.

Analisaram-se córneas armazenadas para transplantes tectônicos usando-se suabes coletados de 20 coelhos, visando ao isolamento e à identificação de microrganismos. Após a coleta das amostras, os coelhos foram submetidos à eutanásia, por razões alheias ao estudo, e enucleados. As córneas foram coletadas e armazenadas a fim de se constituir o banco de córneas. O armazenamento deu-se em solução de tobramicina 0,3% a -20ºC, por 30 dias. Após esse período, as córneas foram descongeladas à temperatura ambiente e removidas da solução de antibiótico. Novos suabes foram coletados e submetidos ao isolamento e à identificação dos microrganismos. A flora corneal mostrou-se predominantemente composta por bactérias Gram positivas, sendo o Staphylococcus sp. o mais identificado. Não se verificou crescimento de colônias bacterianas ou fúngicas nas amostras após o armazenamento. Considerando-se a maneira como a pesquisa foi concebida e as injunções do meio em que ela foi realizada, há como admitir, pela ausência de crescimento microbiano nas amostras armazenadas, que a técnica de armazenamento empregada é segura para a estocagem de córneas destinadas a transplantes.

Alterations in the duodenum myenteric neurons of Wistar ratsafter ingesting of 2, 4 dichlorophenoxyacetic acid

The 2,4 dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) is a systemic herbicide whose effects in animal organic systemshave been examined in previous studies, being the neurotoxicity considered the predominant effect. However,the studies that detect the 2,4-D neurotoxicity have merely focused in the central nervous system, andtherefore, little is known about the effect of this herbicide in the enteric nervous system. This study aimedto verifying the 2,4-D effects on the myenteric neurons in duodenum of Wistar rats. Ten 60-day-old maleWistar rats (Rattus norvegicus) were divided in two groups: control group (C) that did not receive 2,4-D andexperimental group (E) that received 5.0 mg of 2,4-D/kg for 15 days. At the end of experimental period, theanimal were euthanized, the duodenum was collected and processed for NADPH-diaphorase histochemicalanalysis in order to expose the nitrergic myenteric neurons (NADPH-dp). In the light microscopy analysis, thewhole-mount preparation obtained from duodenum of each animal were image-captured in 120 and 40 fields,for quantitative and morphometric analyses of myenteric neurons, respectively. The neuronal density was notaffected when comparing the two groups, but an increase (p > 0.05) of 8.5% was observed in the cell bodyarea of neurons in the E group. In conclusion, the ingestion of 2,4-D at a dosage of 5.0 mg/kg body weightfor 15 days does not change the neuronal density, but promotes the hypertrophy of NADPH-dp myentericneurons in duodenum of the rats of this study.

Morphologic features frommdxmice spleens, used for duchenne muscular dystrophy studies

The mdx mice model is widely used for Duchenne muscular dystrophy (DMD) studies, which is present in a high percentage from newborns human males. Therefore, the aim of this study was to evaluate possible morphological changes from spleens in these mice and to compare with normal mice (Mus musculus) in contribution to DMD understanding and its consequences on immune system by affected individuals. The study was performed by light and scanning electron microscopy (SEM) techniques beyond immunohistochemistry. Was found microscopically an increased number of lymph nodes and decreased in red pulp region by mdx, beyond a larger VEGF-C (vascular endothelial growth factor C) expression stimulates lymphangiogenesis in red pulp region from spleen. These findings suggest a spleen adaptation in order to supply immunological demand due upper respiratory infection, which are common in individuals affected by Duchenne muscular dystrophy.

Comparative study of the kidneys from dystrophic mice

The Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a recessive genetic disease linked to chromosome X. Thisdisease is characterized by an absence or dysfunction in the expression of dystrophin. Experimental modelsmdxare widely used for the development of research addressing the DMD. The objective of this research is tocontribute to a detailed study of possible renal morphological changes resulting from DMD. We used five pairsof kidneys frommdxmice and five from normal mice, which were subjected to measurement, light microscopy,and scanning electron microscopy. The morphological findings of kidneys frommdxmice are within thepatterns described in animal studies with severe dehydration, which exhibit signs of diffuse hemorrhage inthe cortical and medullary area, while the glomeruli in the cortical region showed a decrease in urinary space,located between the Bowman’s capsule and the inner cell mass of the glomeruli. However, future experimentswith animals in different ages can assist in the proving of the morphological changes found here.

Emergency euthanasia of cattle challenged with Escherichia coli O157:H7 - A case study for evaluating the response to an infectious disease outbreak

In the event of an infectious disease outbreak in cattle, carcasses must be disposed of in a rapid and contained manner. This brief communication details injection of a barbiturate to euthanize cattle inoculated with Escherichia coli O157:H7 followed by carcass composting in a manner that prevents the spread of infectious agents.

Alterações no tendão de Aquiles após inflamação em tecido adjacente / Alterations in the Achilles tendon after inflammation in surrounding tissue

OBJETIVO: Analisar as características de tendões de Aquiles de ratos após indução de processo inflamatório localizado na pata. MÉTODOS: Foram utilizados três grupos experimentais: grupo inflamado com carragenina na pata de rato (G1); grupo salina (G2) e grupo controle (G3). Após 4 horas os animais foram eutanaziados e o tendão de Aquiles foi removido. RESULTADOS:Não foram observadas diferenças significativas nas análises de proteínas não colagênicas, glicosaminoglicanos e hidroxiprolina, mas uma tendência a diminuição foi verificada em G1. Em organização de moléculas de colágeno não foram observadas diferenças entre os grupos. Com respeito à atividade de MMPs, foi observada uma presença maior da isoforma ativa da MMP-2 em G1, sugerindo que a remodelação do tecido está ocorrendo. CONCLUSÃO: Desta forma, nós concluímos que o processo inflamatório desencadeado em pata de rato pode afetar o remodelamento de tendões situados próximo ao local inflamado. Nível de Evidência I, Estudos Prognósticos - Investigação do Efeito de Característica de um Paciente Sobre o Desfecho da Doença.

OBJECTIVE: To analyze the characteristics of the Achilles tendon of rats after induction of localized inflammation in the rat paw. METHODS: In our study three groups were used: inflamed group with carrageenan in rat paw (G1); saline group (G2) and control group (G3). After 4 hours the animals were euthanized and the Achilles tendon removed. RESULTS: No significant differences were observed in the analysis of non-collagenous proteins, glycosaminoglycans and hydroxyproline in the groups but a tendency of reduction was verified in G1. About the organization of collagen molecules, no differences were observed between groups. With respect to MMPs activity, a stronger presence of the active isoform of MMP-2 in G1 was observed, suggesting that the remodeling was occurring. CONCLUSION: Thus, we conclude that the inflammatory process in rat paw may affect the remodeling of tendons located near the inflamed site. Level of Evidence I, Prognostic Studies - Investigating the Effect of a Patient Characteristic on the Outcome of Disease.